隐形 CRISPR 横空出生避世！Cell：免疫健全模子解锁癌症转移新靶点，AMH-AMHR2 轴成抗癌新但愿

免疫系统是匹敌肿瘤转移的要害气力，是以在免疫功能完全的模子中研究癌症，才能真正还原患者体内的疾病历程——但这一方针持久被 CRISPR/Cas9 手艺的固出缺陷所阻碍。借助 CRISPR/Cas9，科学家能构建包括数百个基因敲除肿瘤细胞的文库，移植到小鼠体内后，便可快速挑选影响癌症成长的要害基因，为新疗法开辟供给焦点靶点。

但是，CRISPR/Cas9 的焦点组分（如 Cas9 核酸酶）源自细菌，会被免疫系统辨认为 “外来入侵者”，激发强烈免疫反映，这一问题一向被轻忽。

苏黎世联邦理工学院 Nicola Aceto 传授团队在《细胞》杂志颁发的研究，初次具体证实了这类免疫反映会严重扭曲挑选成果，并立异性地开辟出 StealTHY 平台——给 CRISPR 披上 “份子隐形大氅”，使其在免疫健全小鼠甚至人源化小鼠中 “隐身” 工作，成功解锁了被袒护的癌症转移要害靶点。

传统 CRISPR/Cas9 的免疫干扰问题比想象中更严重。研究团队在乳腺癌、肺癌、结直肠癌等多种免疫健全小鼠模子中发现，表达 Cas9 或经常使用陈述基因（如 GFP、嘌呤霉素抗性基因 PuroR）的肿瘤细胞，会被 T 细胞快速辨认并排挤：不但肿瘤发展被按捺，转移灶数目年夜幅削减（部门模子转移几近完全消逝）。

更要害的是，sgRNA 文库的克隆多样性急剧降落——本来包括数千种基因敲除的肿瘤细胞库，终究只有少数克隆存活，致使真实的转移调控基因被漏掉。这类 “免疫编纂” 效应会造成严重的成果掉真：好比已知的转移按捺基因 Trim72 在传统挑选中被毛病疏忽，而无关基因却因免疫逃逸被误判为要害靶点。更值得警戒的是，这类干扰在人源化小鼠（huNSGs）中一样存在，Cas9 阳性的人类肿瘤细胞会激发人类 T 细胞反映，完全没法摹拟患者体内的真实转移进程。

StealTHY 平台的 “隐形术” 焦点在在三点立异，完全规避免疫辨认。起首是 “瞬时编纂+快速断根”：团队采取脱辅基 Cas9（Apo-Cas9）进行瞬时递送，Cas9 在完成基因编纂后 48 小时内即被细胞断根，避免持久逗留激发免疫反映；同时经由过程 “hara-kiri” 自靶向系统，快速分手出基因编纂成功的细胞，确保移植到小鼠体内的肿瘤细胞不含任何细菌来历组分。其次是 “自体陈述基因替换”：用小鼠本身卵白 Thy1 的两种亚型（Thy1.1/Thy1.2）替换 GFP 和 PuroR，这类自体卵白不会激发免疫排挤，还能精准追踪肿瘤细胞。最后是 “全人源适配”：在人源化小鼠中，团队将人类 THY1 基因革新后作为陈述基因，一样实现了免疫隐身。这套 “hit-and-run” 编纂策略，让 CRISPR 挑选初次在免疫健全模子中连结了 sgRNA 文库的完全性，克隆多样性比传统方式高 5 倍以上。

借助 StealTHY，团队成功挑选出此前被袒护的转移要害靶点——AMH-AMHR2 旌旗灯号轴。在乳腺癌、肺癌等多种模子中，敲除 AMH 或 AMHR2 基因后，肿瘤转移灶数目急剧削减，小鼠保存期显著耽误；而在人源化小鼠中，经由过程 AMHR2Δ（一种显性负突变体，可竞争性连系 AMH，阻断旌旗灯号传导）医治，能使患者来历的肿瘤（PDX）转移率下降 80%，且激发肿瘤微情况重塑——调理性 T 细胞削减，抗原呈递巨噬细胞增多，打破了肿瘤免疫耐受。

更具临床价值的是，TCGA 数据库阐发显示，AMH 高表达的乳腺癌、肺癌患者，复发率更高、保存期更短；而 AMH 旌旗灯号缺掉的患者，预后较着更好，这证实 AMH-AMHR2 轴是临床相干的转移驱动因子。

这套 “隐形 CRISPR” 手艺的利用前景远超癌症研究。它不但能在免疫健全小鼠、人源化小鼠中展开精准的基因挑选，还可用在个性化医疗，好比构建患者特异性肿瘤模子，挑选最有用的医治靶点；在本身免疫疾病、CAR-T 细胞工程等范畴，也能避免外源基因激发的免疫干扰。Aceto 传授强调：“曩昔我们因免疫干扰错过了很多要害靶点，而 StealTHY 让我们第一次在接近患者的心理情况中，看清了癌症转移的真实机制。”

从解决手艺瓶颈到发现临床靶点，StealTHY 平台不但改革了 CRISPR 挑选的利用场景，更让癌症转移研究解脱了对免疫缺点模子的依靠。AMH-AMHR2 轴的发现，为转移性癌症供给了全新的医治标的目的，而 “免疫隐身” 的编纂策略，也为基因医治、免疫疗法研究斥地了新路径。将来，跟着手艺的进一步优化，也许能让更多被免疫系统 “袒护” 的疾病机制浮出水面，为精准医疗供给更坚实的科学根据！（Bioon.com）

参考文献：

Massimo Saini et al, StealTHY: An immunogen-free CRISPR platform to expose concealed metastasis regulators in immunocompetent models, Cell (2025). DOI: 10.1016/j.cell.2025.10.007.