治“冷肿瘤”有新招！Bioact Mater：益生菌纳米囊泡重塑免疫微情况，免疫医治增效获人肺癌类器官左证

免疫查抄点医治是恶性肿瘤医治范畴的主要冲破，显著改良了黑色素瘤、非小细胞肺癌等患者的保存率。但胰腺癌等“冷肿瘤”因免疫按捺微情况较着、CD8⁺T细胞浸润不足，对该疗法的响应率一向处在较低程度。肠道菌群疗法虽能经由过程重塑肿瘤免疫微情况，将“冷肿瘤”转化为“热肿瘤”，却存在细菌易移位激发传染、代谢产品难以定量节制等平安隐患。

Bioact Mater颁发的一项研究Probiotic-inspired hybrid nanovesicles for enhancing immune checkpoint therapy efficiency via tumor immune microenvironment modulation为解决这一临床困难供给了全新的纳米医治思绪。

研究团队起首融会年夜肠杆菌排泄的外膜囊泡（OMV）与巨噬细胞膜载体（RV），构建出杂化纳米囊泡（ROMV），随后将肠道菌群代谢产品三甲胺N-氧化物（TMAO）包封此中，终究构成ROMV/TMAO纳米制剂。理化表征成果显示，OMV、ROMV、ROMV/TMAO的水动力直径别离为87.2±0.7纳米、90.1±0.9纳米和83.6±1.7纳米，zeta电位均呈负值，且在含10%血清的PBS溶液中孵育72小时后，粒径和多分离性指数仍能连结不变。细胞尝试进一步证实，ROMV/TMAO可被4T1细胞有用摄取，而且在6小时内就可以成功逃逸溶酶体降解，为后续阐扬感化奠基根本。

 图1：ROMV/TMAO的设计与表征

在体内靶向性与生物平安性评估中，用DiR标识表记标帜的ROMV/TMAO在4T1乳腺癌模子和Kras^LSL-G12D/+肺癌模子里揭示出凸起的肿瘤靶向能力，24小时后肿瘤部位的荧光强度远高在游离DiR组。平安性方面，分歧剂量ROMV/TMAO处置后的小鼠存活率均到达100%，体重未呈现较着波动，肝肾功能指标、血液常规指标也都保持在正常规模。同时，该制剂还能减轻OMV激发的IL-6、TNF-α等炎症因子释放，且不会引诱TMAO相干的动脉粥样硬化风险，生物平安性获得充实验证。

 图2：ROMV/TMAO的肿瘤靶向能力、生物平安性和抑瘤结果评估

在4T1乳腺癌模子中，零丁利用ROMV/TMAO医治就揭示出显著的肿瘤按捺结果。数据显示，该组小鼠的肿瘤重量仅为0.41±0.08克，远低在PBS对比组的1.20±0.10克。单细胞RNA测序成果注解，ROMV/TMAO处置后，肿瘤浸润免疫细胞中CD8⁺T细胞和M1样巨噬细胞的比例显著升高，Treg细胞和M2样巨噬细胞的比例则较着下降。

差别表达基因阐发发现，免疫刺激基因、CD8⁺T细胞标识表记标帜基因和细胞毒性效应份子基因均被显著上调，I型干扰素和TLR通路焦点基因的表达也呈现较着增添。流式细胞术和免疫组化成果进一步验证，ROMV/TMAO能让肿瘤内M1样巨噬细胞比例增至34.6%，CD8⁺T细胞浸润率到达35.8±3.3%。当研究人员耗竭CD8⁺T细胞或巨噬细胞后，ROMV/TMAO的抑瘤结果年夜幅削弱，这一成果证实了这两种细胞是其阐扬抗肿瘤感化的要害载体。

 图3：ROMV/TMAO的体内免疫激活能力

研究团队还进一步摸索了ROMV/TMAO与免疫查抄点按捺剂α-PD-L1的结合医治结果。在4T1乳腺癌、Kras^LSL-G12D/+肺癌和KPC胰腺癌模子中，结合医治组的肿瘤按捺结果均显著优在单药医治组。此中在4T1模子中，结合医治组小鼠的肿瘤重量比α-PD-L1单药组下降约50%；在Kras^LSL-G12D/+肺癌模子中，肺组织的肿瘤面积年夜幅削减。同时，结合医治组肿瘤内CD8⁺T细胞浸润进一步增添，Foxp3⁺Treg细胞比例下降，小鼠存活率显著晋升，且全部医治进程中未呈现较着体重降落，表现出杰出的生物相容性。

 图4：ROMV/TMAO结合α-PD-L1在4T1乳腺癌模子和Kras^LSL-G12D/+肺癌模子中的抑瘤结果

为验证该制剂的临床转化潜力，研究人员操纵肺癌患者的肿瘤样本构建了人肺癌类器官，90这些类器官成功重现了原肿瘤的形态特点和标记物表达模式。共培育尝试成果显示，ROMV/TMAO能有用增进人外周血单个核细胞中的CD8⁺T细胞向类器官内浸润；当结合α-PD-L1利用时，类器官内肿瘤细胞的灭亡数目显著增添，IFN-γ和颗粒酶B的程度也年夜幅升高，这一成果注解该纳米制剂在人源模子中一样能有用加强免疫查抄点医治结果。

图5：ROMV/TMAO在人肺癌类器官中的抑瘤活性和CD8⁺T细胞浸润环境

这项研究立异性地将益生菌的免疫调理成份与纳米靶向手艺相连系，成功构建出ROMV/TMAO杂化纳米囊泡。该制剂既保存了肠道菌群的免疫调控功能，又避开了活体益生菌可能带来的平安风险。经由过程精准靶向肿瘤、重塑肿瘤免疫微情况，ROMV/TMAO成功加强了免疫查抄点医治在多种“冷肿瘤”模子中的疗效，且在人肺癌类器官中揭示出杰出的利用前景。这一医治策略不但为肿瘤免疫医治范畴供给了新的东西，更加后续开辟基在肠道菌群的纳米医治平台奠基了根本，将来有望为更多灾治性肿瘤患者带来新的医治但愿。（Bioon.com）

参考文献：

Wang F, Fan J, Pan W, et al. Probiotic-inspired hybrid nanovesicles for enhancing immune checkpoint therapy efficiency via tumor immune microenvironment modulation. Bioact Mater. 2025;56:197-216. Published 2025 Oct 17. doi:10.1016/j.bioactmat.2025.10.012